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ORIGINAL
Actualidad
Médica
A C T U A L I D A D
M É D I C A
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Validación del sistema automatizado
Bact/Alert en el control microbiológico
de productos celulares de Terapias Avanzadas
Resumen
Objetivo.
El Control de calidad para demostrar que un producto está libre de agentes microbianos adventicios es un aspecto
clavede control deprocesos y evaluaciónde la calidadde todas las preparacionesmedicinales celulares y en la ingeniería tisu-
lar.ElobjetivodeesteestudioesvalidarelsistemadedetecciónporhemocultivoBacT/ALERTparaelcontrolmicrobiológicodelascélulas
mesenquimalesparaterapiacelular,segúnlaFarmacopeaEuropea(EU.PH),2.6.27.“Controlmicrobiológicodeproductoscelulares”(1).
Método.
Para el cálculo del límite de detección las botellas de hemocultivo fueron inoculadas e incubadas con 4 réplicas de
30UFC, 5 réplicas de 15UFC y 5 réplicas de 6UFCde losmicroorganismos en ausencia de producto celular. Se llevaron a cabo
también experimentos en presencia de producto con 400.000 células mesenquimales. Este método se ha comparado con
el método de referencia de Esterilidad de la EU.PH (2). La especificidad se ensayó inoculando 5 réplicas con 400.000 células
mesenquimales sinmicroorganismos.
Resultados.
Todas lasbotellas inoculadasconcélulasmesenquimalessinmicroorganismospermanecieronnegativasdespués
de 7 días de incubación. Todas las botellas inoculadas con cepas bacterianas aerobias y anaerobias fueron detectadas como
positivas por el sistema, en el caso del límite inferior (6UFC) enmenos de 36 horas. Se detectaron como positivas las botellas
inoculadasconCandidaalbicans(6UFC)enmenosde48horasyconAspergillusniger(6UFC)enmenosde72horas.Nohubo
diferencias notables en el tiempo de detección entre botellas inoculadas con y sin la presencia de célulasmesenquimales.
Conclusión:
ElsistemadedeteccióndehemocultivosBact/Alertesunmétodofiableparaladeteccióndelacontaminaciónmicrobianademe-
dicamentosabasedecélulasmesenquimalesycumplelosrequisitosdelaUEPH,2.6.27,paraelcontrolmicrobiológicodeproductoscelulares.
Abstract
Objective.
Quality control to demonstrate that a product is free fromadventitious microbial agents is a key aspect of process
control and quality evaluation of all cell medicinal preparations and in tisular engineering.
EvaluatethevalidationoftheBacT/ALERTBloodCultureSystemforthemicrobialcontrolofmesenchymalcellsforcelltherapy
according European Pharmacopoeia (EU.PH), 2.6.27. “Microbiological control of cellular products” (1).
Method.
Blood culture bottleswere challengedwith 4 replica of 30 cfu, 5 replica of 15 cfu and 5 replica of 6 cfu of the testmi-
croorganisms. Test were also carried out in the presence in each contaminated culture bottle of 400.000mesenchymal cells.
Thismethod has been comparedwith the referencemethod for Sterility of the EU.PH (2). Specificitywas tested inoculating 5
replicas of broth culturemediawith 400.000 cells without microorganisms.
Results.
Allbottleschallengedwithmesenchymalcellswithoutmicroorganismsremainednegativeafter7daysofincubation.Allino-
culatedbottleswithaerobicandanaerobicbacterialstrainswereflaggedaspositiveforthesystem,incaseoflowinoculum(6cfu)inless
than36hours.Candidainoculatedbottles(6cfu)weredetectedinlessthan48hoursandAspergillus(6cfu)inlessthan72hours.There
werenosignificantdifferencesinthedetectiontimebetweenbottlesinoculatedwithandwithoutthepresenceofmesenchymalcells.
Conclusion:TheBacT/ALERTbloodculturedetectionsystemandisareliablemethodfordetectionofmicrobialcontaminationofmes-enchymalcellsmedicinalproductsthatfulfilstherequirementsoftheEUPH,2.6.27,forthemicrobiologicalcontrolofcellularproducts.
Antonio Ruiz-García
1,2,3
, Jorge Guerrero Calvo
1,2,3
, Natividad Fernández Porcel
1,2,3
, Olga
Espinosa Ibáñez
2,3
, Antonio Manuel Lizana Moreno
2,3
, Ana Fernandez Gonzalez
2,3
,
Salvador Arias Santiago
2,3
1
ECAI Unidad de Calidad de la Unidad Producción Celular e Ingeniería Tisular. Instituto de Investigación Biosanitaria
ibs. GRANADA. Complejo Hospitalario Universitario de Granada. Granada, Spain
2
Unidad Producción Celular e Ingeniería Tisular. Instituto de Investigación Biosanitaria ibs.GRANADA. Complejo
Hospitalario Universitario de Granada. Granada, Spain
3
Iniciativa Andaluza en Terapias Avanzadas.
Enviado: 30-03-2016
Revisado:15-04-2016
Aceptado: 27-04-2016
Palabras clave: esterilidad,
control microbiológico, terapias
avanzadas.
Keywords: sterility,
microbiological control,
advanced therapies.
Validation of Bact/Alert automathic system
in the microbiological control of cell medicinal products
of Advanced Therapies
Actual. Med.
2016; 101: (797): 24-29
DOI: 10.15568/am.2016.797.or04Antonio Ruiz García
Unidad de Producción Celular e Ingeniería Tisular. Instituto Biosanitario de
Granada. Hospital Universitario Virgen de las Nieves
Av. Fuerzas Armadas nº 2, 4ª Planta Edificio de Gobierno. 18014 - Granada
Teléfono: 958 020 401 / 652 812 160
E-mail:
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