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7

ORIGINAL

Actualidad

Médica

A C T U A L I D A D

M É D I C A

www.actualidadmedica.es

©2015.Actual.Med.Todoslosderechosreservados

Generación y caracterización de

un modelo lesional corneal ex vivo

para su uso en ingeniería tisular

Resumen

Objetivos

:

En el presente estudio se pretende generar y caracterizar un modelo lesional corneal

ex vivo

, con

el fin de poder evaluar la viabilidad de los tejidos artificiales creados mediante Ingeniería Tisular a través de

la aplicación de una causticación controlada con NaOH sobre córneas de cerdo.

Métodos:

Se llevó a cabo un estudio descriptivo tomando 18 ojos de cerdos adultos, inmediatamente des-

pués de morir. Los globos oculares se introdujeron en NaOH 1,5 M durante 1, 2, 3 y 5 minutos. Tras lo cual

se lavaron con agua corriente (5 minutos) y se realizó un lavado rápido con PBS, seguido de un lavado de 2

minutos en PBS. Se incluyeron dos grupos control: uno de córneas no tratadas, y otro de córneas a las que

se les realizó lavados de agua corriente y PBS. Las muestras fueron procesadas para el análisis histológico

mediante microscopía óptica con las tinciones de hematoxilina eosina, picrosirius y azul alcian. Se determinó

la significación de los resultados obtenidos mediante el análisis estadístico ANOVA.

Resultados:

Se observó una pérdida del endotelio y del epitelio corneal en todos los grupos tratados con

NaOH. Asimismo se objetivó una tendencia a la compactación de las fibras colágenas tras el tratamiento

con NaOH en la tinción de picrosirius y la pérdida de fibras de coloración verde en las muestras tratadas

con NaOH con respecto a los controles. Pese a observarse una menor intensidad en la tinción de azul alcian

en la región posterior con respecto a las otras dos y entre las distintas muestras tratadas con NaOH, no se

encontraron diferencias significativas en este aspecto.

Conclusiones:

se ha logrado crear un modelo lesional sencillo, de bajo coste y que no implica problemas

éticos, que permitiría evaluar los tejidos artificiales creados mediante Ingeniería Tisular.

Abstract

Purpose:

This study aims to generate and characterize an

ex vivo

corneal injury model, in order to assess the

feasibility of artificial tissues created by using tissue engineering through the application of a corneal alkali

burn with NaOH on porcine corneas.

Methods:

We conducted a descriptive study taking 18 eyes of adult pigs immediately after their death. Eyes

were introduced on 1.5M NaOH for 1, 2, 3 and 5 minutes. After, they were washed with running water (5

min) and rapid washing with PBS, followed by a 2 minute wash in PBS was performed. Two control groups

were included: untreated corneas and another corneas were performed running water washes and PBS

whashes. Samples were processed for histological analysis by light microscopy with hematoxylin and eosin,

alcian blue and picrosirius staining. The significance of the results was determined by ANOVA statistical

analysis.

Results:

We observed a loss of endothelium and the corneal epithelium in all groups treated with NaOH.

A tendency to compaction of collagen fibers after treatment with NaOH and picrosirius stain loss of green

coloration fibers in samples treated with NaOH with respect to controls was also observed. Despite lower

intensity observed in alcian blue staining in the posterior region compared to the other two and between

samples treated with NaOH, no significant differences were found in this area.

Conclusions

: it has created a single lesion model, low cost and does not involve ethical issues, to assess the

tissue created by Tissue Engineering.

González- Andrades, E

1

; Ionescu, AM

2

; Cardona, JC

2

; Ghinea, R

2

; Garzón, I

1

; Carriel, V

1

;

González- Andrades, M

1

.

1

Grupo de Ingeniería Tisular, Departamento de Histología, Universidad de Granada. Instituto de Investigación

Biosanitaria IBS.

2

Departamento de Óptica, Facultad de Ciencias, Universidad de Granada.

Enviado: 21-11-2015

Revisado: 20-01-2016

Aceptado: 23-02-2016

González- Andrades, M.

Departamento de Histología, Facultad de Medicina, Universidad de Granada

Avenida de Madrid 11, E18012, Granada, Spain.

Teléfono: +34 958243514; fax: +34 958244034

E-mail:

mgandrades@gmail.com

Palabras clave: Ingeniería

tisular; córnea artificial;

causticación, modelo lesional,

modelo ex vivo.

Keywords: Tissue engineering;

artificial cornea; caustic burn,

injury model, ex vivo model.

Generation and characterizationof an in vivomodel of corneal

lesion for use intissue engineering

DOI: 10.15568/am.2016.797.or01

Actual. Med.

2016; 101: (797): 7-12