

7
ORIGINAL
Actualidad
Médica
A C T U A L I D A D
M É D I C A
www.actualidadmedica.es©2015.Actual.Med.Todoslosderechosreservados
Generación y caracterización de
un modelo lesional corneal ex vivo
para su uso en ingeniería tisular
Resumen
Objetivos
:
En el presente estudio se pretende generar y caracterizar un modelo lesional corneal
ex vivo
, con
el fin de poder evaluar la viabilidad de los tejidos artificiales creados mediante Ingeniería Tisular a través de
la aplicación de una causticación controlada con NaOH sobre córneas de cerdo.
Métodos:
Se llevó a cabo un estudio descriptivo tomando 18 ojos de cerdos adultos, inmediatamente des-
pués de morir. Los globos oculares se introdujeron en NaOH 1,5 M durante 1, 2, 3 y 5 minutos. Tras lo cual
se lavaron con agua corriente (5 minutos) y se realizó un lavado rápido con PBS, seguido de un lavado de 2
minutos en PBS. Se incluyeron dos grupos control: uno de córneas no tratadas, y otro de córneas a las que
se les realizó lavados de agua corriente y PBS. Las muestras fueron procesadas para el análisis histológico
mediante microscopía óptica con las tinciones de hematoxilina eosina, picrosirius y azul alcian. Se determinó
la significación de los resultados obtenidos mediante el análisis estadístico ANOVA.
Resultados:
Se observó una pérdida del endotelio y del epitelio corneal en todos los grupos tratados con
NaOH. Asimismo se objetivó una tendencia a la compactación de las fibras colágenas tras el tratamiento
con NaOH en la tinción de picrosirius y la pérdida de fibras de coloración verde en las muestras tratadas
con NaOH con respecto a los controles. Pese a observarse una menor intensidad en la tinción de azul alcian
en la región posterior con respecto a las otras dos y entre las distintas muestras tratadas con NaOH, no se
encontraron diferencias significativas en este aspecto.
Conclusiones:
se ha logrado crear un modelo lesional sencillo, de bajo coste y que no implica problemas
éticos, que permitiría evaluar los tejidos artificiales creados mediante Ingeniería Tisular.
Abstract
Purpose:
This study aims to generate and characterize an
ex vivo
corneal injury model, in order to assess the
feasibility of artificial tissues created by using tissue engineering through the application of a corneal alkali
burn with NaOH on porcine corneas.
Methods:
We conducted a descriptive study taking 18 eyes of adult pigs immediately after their death. Eyes
were introduced on 1.5M NaOH for 1, 2, 3 and 5 minutes. After, they were washed with running water (5
min) and rapid washing with PBS, followed by a 2 minute wash in PBS was performed. Two control groups
were included: untreated corneas and another corneas were performed running water washes and PBS
whashes. Samples were processed for histological analysis by light microscopy with hematoxylin and eosin,
alcian blue and picrosirius staining. The significance of the results was determined by ANOVA statistical
analysis.
Results:
We observed a loss of endothelium and the corneal epithelium in all groups treated with NaOH.
A tendency to compaction of collagen fibers after treatment with NaOH and picrosirius stain loss of green
coloration fibers in samples treated with NaOH with respect to controls was also observed. Despite lower
intensity observed in alcian blue staining in the posterior region compared to the other two and between
samples treated with NaOH, no significant differences were found in this area.
Conclusions
: it has created a single lesion model, low cost and does not involve ethical issues, to assess the
tissue created by Tissue Engineering.
González- Andrades, E
1
; Ionescu, AM
2
; Cardona, JC
2
; Ghinea, R
2
; Garzón, I
1
; Carriel, V
1
;
González- Andrades, M
1
.
1
Grupo de Ingeniería Tisular, Departamento de Histología, Universidad de Granada. Instituto de Investigación
Biosanitaria IBS.
2
Departamento de Óptica, Facultad de Ciencias, Universidad de Granada.
Enviado: 21-11-2015
Revisado: 20-01-2016
Aceptado: 23-02-2016
González- Andrades, M.
Departamento de Histología, Facultad de Medicina, Universidad de Granada
Avenida de Madrid 11, E18012, Granada, Spain.
Teléfono: +34 958243514; fax: +34 958244034
E-mail:
mgandrades@gmail.comPalabras clave: Ingeniería
tisular; córnea artificial;
causticación, modelo lesional,
modelo ex vivo.
Keywords: Tissue engineering;
artificial cornea; caustic burn,
injury model, ex vivo model.
Generation and characterizationof an in vivomodel of corneal
lesion for use intissue engineering
DOI: 10.15568/am.2016.797.or01Actual. Med.
2016; 101: (797): 7-12