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72

Raquel Camacho Luque

Sepsityper® para la identificación rápida de microorganismos

gativo fue excelente, tanto para el género como para la especie.

Sólo hubo un caso en el que la ID convencional (Wider) fue

Aero-

monas hydrophila

mientras que la identificación por MALDITOF-

MS® fue

Aeromonas veronii

(14).

Respecto a la identificación de los microorganismos GRAM

positivos, destaca la concordancia del 100% en todos los casos

de

S

taphylococcus

aureus (13/13)

(15), y

Enterococcus

(4/4) (16).

Sin embargo, dentro del grupo de Estafilococos Coagulasa Ne-

gativo (ECN) (17), el porcentaje de correlación de identificación

en género fue del 98.9% debido a una discrepancia, donde el

sistema MALDITOF-MS® identificó como

Rothia mucilaginosa

,

mientras que la identificación convencional a través de identi-

ficación automatizada por sistema WIDER® lo identificó como

S

epidermidis.

Respecto a la identificación a nivel de especie en

ECN, la concordancia fue del 86.5% debido a que el sistema

WIDER® identificó 11 casos de bacteriemia por

S

taphylococcus

hominis,

mientras que MALDITOF-MS® identificó 9 casos de

S

ta-

phylococcus

epidermidis,

1 caso de

S

taphylococcus

warnerii,

y

otro caso de

S

taphylococcus

simulans.

Finalmente MALDITOF-

MS® diagnóstico un caso

S hominis que

por el contrario

el sis-

tema WIDER® lo identificó como

S haemolyticus.

En relación al

género

Streptococcus

, la identificación a nivel de especie fue del

66.7%, debido a que de los dos casos en los que la identificación

por MALDITOF-MS® resultó ser

Streptococcus pneumoniae

, di-

cha identificación no se correlacionó con la identificación reali-

zada mediante métodos bioquímicos tales como la sensibilidad

en disco-placa a la optoquina y la bacitracina, las cuales fueron

complementadas con baterías comerciales API-Strept® (Biomé-

rieaux). Respecto a los aislamientos de bacilos GRAM positivo

(BGP), solo analizamos 4 casos de BGP aerobios (1

Corynebacte-

rium spp

, 2 casos de

Bacillus circulans

, 1 bacteriemia por

Listeria

monocytogenes

); y 3 casos de BGP anaeróbicos (2

Clostridium

perfringens

y un

Propinebacterium acnés)

. En todos los casos la

concordancia de resultados tanto en género como en especie fue

del 100% por ambos sistemas de identificación. Todos los datos

del estudio de concordancia se describen en la Tabla1.

Nuestra principal limitación a la hora de obtener un resulta-

do tras análisis por espectrometría de masas MALDI-TOF MS ha

sido la no obtención del pellet tras la centrifugación del mililitro

de hemocultivo positivo junto a la solución Lysis buffer. En nues-

tro estudio esto sólo ha ocurrido en 5 casos (1,3%), no obtenien-

do finalmente una identificación del microorganismo por medio

de MALDI-TOF MS.

DISCUSIÓN

La importancia de la mortalidad asociada al retraso en el

inicio de un tratamiento antibiótico correcto en la actualidad

condiciona al microbiólogo clínico a adaptar sus protocolos diag-

nósticos, en especial en el caso de la bacteriemia. La rapidez y

relativa sencillez del uso de la espectrometría de masas ya ha

demostrado su utilidad en comparación con otros sistemas diag-

nósticos en el laboratorio de microbiología (18-21). El diagnós-

tico del agente etiológico productor de la bacteriemia requiere

el cultivo previo del microorganismo en medio sólido desde los

frascos de hemocultivo positivo, lo que supone un retraso de al

menos 8-24 horas. Aunque la tinción de gram del hemocultivo

positivo es informativa, la posibilidad de disponer en ese mis-

mo momento de la identificación de género y especie supone

un gran avance, que tiene una inestimable aplicación tanto en

la clínica como en la gestión de los costes en antibioterapia y

en días de ingreso hospitalario (22). Con este método de traba-

jo hemos conseguido adelantar el resultado de la identificación

del microorganismo causante de bacteriemia en 17 a 23 horas

durante la jornada laboral y de 13 a 16 horas en periodo de con-

tinuidad asistencial. Siendo nuestro volumen de trabajo de una

media de 7 frascos de hemocultivo positivos al día durante la

jornada laboral y 2 durante el periodo de continuidad asisten-

cial, utilizamos este nuevo método de identificación en un frasco

de hemocultivo positivo (aeróbico y anaeróbico) de una de las

distintas tomas de cada paciente (una, dos o tres tomas de he-

GRAM POSITIVOS

IDENTIFICACIÓN STANDARD vs ID. MALDITOF-MS®

(n)

Concordancia

Género n (%)

Concordancia

Especie n (%)

Id discrepante

Total

124 123 (98.2)

106 (82.5)

S. aureus

13 13 (100)

13 (100)

SCN

S. epidermidis

S. hominis

S. warneri

S. capitis

S. haemolyticus

S. simulans

89

29

40

2

4

11

3

88 (98.9)

28

40

2

4

11

3

76 (85.4)

28

29

2

4

10

3

Rothia mucilaginosa

S. epidermidis

(9)

/ S warneri /S

simulans

S. hominis

Enterococcus

E. faecalis

E. faecium

4

3

1

4 (100)

3

1

4 (100)

3

1

Streptococcus

S. pneumoniae

S. viridans

7

1

6

7 (100)

1

6

5 (66.7)

1

4

S. pneumoniae

(2)

Corynebacterium

spp

Bacillus circulans

Listeria

monocytogenes

Micrococcus

luteus

1

2

1

4

1

2

1

4

1

2

1

4

GRAM

NEGATIVOS

IDENTIFICACIÓN STANDARD vs ID. MALDITOF-MS®

(n)

Concordancia

Género n (%)

Concordancia

Especie n (%)

Id discrepante

Total

42 42 (100)

40 (95.2)

Escherichia coli

23 23 (100)

23 (100)

Pseudomonas

aeruginosa

9

9 (100)

8 (88.9)

Pseudomonas

stutzeri

Klebsiella

K. oxytoca

K. pneumoniae

4

2

2

4 (100)

2

2

4 (100)

2

2

Enterobacter

E. aerogenes

E. cloacae

2

1

1

2 (100)

1

1

2 (100)

1

1

Acinetobacter

A. lwoffi

A. baumannii

2

1

1

2 (100)

1

1

2 (100)

1

1

Aeromonas

hydrophila

1 1 (100)

0 (0)

Aeromonas

veronii