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Raquel Camacho Luque

Sepsityper® para la identificación rápida de microorganismos

mocultivo). Reaislando el resto de frascos de las distintas tomas

en medios de cultivo para su posterior identificación mediante

pruebas bioquímicas convencionales.

En nuestro estudio hemos implementado un nuevo mé-

todo para el tratamiento de los hemocultivos positivos, como

paso previo a su análisis mediante MALDITOF-MS®. Hasta el

momento, diversos autores han mostrado los resultados de la

aplicación de diferentes protocolos para procesar el hemocul-

tivo positivo (23), que incluyen desde el volumen de sangre de

hemocultivo utilizado y la centrifugación hasta diversos proto-

colos de extracción, sin un notable grado de estandarización.

Los resultados de nuestro trabajo muestran un grado de

concordancia excelente respecto otros métodos de identifica-

ción, destacando su utilidad en todos los casos de bacteriemias

causadas por bacilos GRAM-negativos, Staphylococcus aureus,

microorganismos del género Enterococcus, y bacterias anaeró-

bicas. No obstante hay que remarcar las limitaciones de esta

tecnología en dos situaciones clínicas: la primera, de gran tras-

cendencia, la bacteriemia por

Streptococcus pneumoniae

y la

posibilidad de confusión por parte del sistema MALDITOF MS®

con

Streptococcus del grupo viridans

(18,24). Este fallo, bien

conocido del sistema MALDITOF-MS®, se debe según algunos

autores, a la gran similitud a nivel proteómico de múltiples

especies de streptococcus, hasta el punto de ser necesario

hacer genotipado molecular de las mismas para su correcta

diferenciación (25); la segunda, de mucha menor trascenden-

cia clínica, es el caso de la asignación de especie para los es-

tafilococos coagulasa negativos, en los que el porcentaje de

concordancia en especie desciende al 86.5%. Hay que destacar,

que en ningún caso hubo discordancias con la identificación de

Sta

phylococcus aureus

, y en todos los casos de discrepancia a

nivel de especie no supuso ningún cambio en el manejo clíni-

co del paciente. Queda aún por esclarecer si la identificación

correcta en estos casos es atribuible a errores en la tecnolo-

gía MALDITOF-MS® o por el contrario se deben a errores en la

identificación convencional. La secuenciación del ARN16S y el

posterior análisis filogenético de las secuencias habría permi-

tido establecer cuál de los dos sistemas estaba emitiendo el

resultado correcto (25).

En resumen, presentamos un estudio en el que se utiliza el

kit Sepsityper (Bruker) y la espectrometría de masas MALDITOF-

MS® para la identificación de patógenos directamente a partir

de frascos de hemocultivos positivos. Esta es una herramienta

rápida y fiable para la identificación del agente etiológico res-

ponsable de bacteriemia en menos de 30 minutos, y sus hallaz-

gos aportan una importante información para la toma de deci-

siones acerca de la antibioterapia empírica instaurada.

REFERENCIAS

1.

Kollef MH, Sherman G, Ward S, Fraser VJ. Inadequate

antimicrobial treatment of infections. A risk factor for hospital

mortality among critically ill patients. Chest. 1999; 115: 462-74.

2.

Kollef M. Appropriate empirical antibacterial therapy for

nosocomial infections: getting it right the first time. Drugs.

2003; 63:2157-68.

3.

Leibovici L, et al. The benefit of appropriate empirical antibiotic

treatment in patients with bloodstream infection. J Intern Med

1998; 244: 379-86.

4.

IbrahimEH, ShermanG,Ward S, Fraser V, KollefM. The influence

of inadequate antimicrobial treatment of bloodstream

infections on patient outcomes in the ICU setting. Chest. 2000;

118: 146-55.

5.

Anhalt JP, Fenselau C. Identification of bacteria using mass

spectrometry. Anal Chem. 1975; 47:219-25.

6.

Holland RD, Wilkes JG, Rafii F, Sutherland JB, Persons CC,

Voorhees KJ, et-al. Rapid identification of intact whole

bacteria based on spectral patterns using matrix-assisted laser

desorption/ionization with time-of-flight mass spectrometry.

Rapid Commun Mass Spectrom. 1996; 10:1227-32.

7.

Krishnamurthy T, Ross P.L. Rapid identification of bacteria

by direct matrix-assisted laser desorption/ionization mass

spectrometry analysis of whole cells. Rapid Commun Mass

Spectrom. 1996; 10:1992-6.

8.

Fenselau C, Demirev P.A. Characterization of intact

microorganisms by MALDI mass spectrometry. Mass Spectrom

Rev. 2001;20:157-71.

9.

Seng P, Drancourt M, Gouriet F, La Scola B, Fournier PE,

Rolain JM, et-al. Ongoing revolution in bacteriology: Routine

identification of bacteria by matrix-assisted laser desorption

ionization time-of-flight mass spectrometry. Clin Infect Dis.

2009; 49:543-51.

10. E Bessède, M. Angla-gre, Y. Delagarde, S. Sep Hieng, A. Ménard

and F. Mégraud. Matrix-assisted laser-desorption/ionization

BIOTYPER: experience in the routine of a University hospital.

Clin Microbiol Infect 2011; 17: 533–538.

11. Seng P, Drancourt M, Gouriet F et al. Ongoing revolution in

bacteriology: routine identification of bacteria by matrix-

assisted laser desorption ionization time-of-flight mass

spectrometry. Clin Infect Dis 2009; 49: 543–551.

12. Stevenson LG, Drake SK, Murray PR. Rapid Identification of

Bacteria in Positive Blood Culture Broths by Matrix-Assisted

Laser Desorption Ionization–Time of Flight Mass Spectrometry.

J Clin Microbiol. 2010 ;48:444-7.

13. Martínez-Lamas L(1), Pérez del Molino ML, Pardo F, Varela

E, Regueiro BJ. Espectrometria de masas matrix-assisted

laser desorption ionization time-of-flight vs. metodologia

convencional en la identificacion de Candida no-albicans.

Enferm Infecc Microbiol Clin. 2011 Oct;29(8):568-72..

14. Dallagassa CB, Surek M, Stets MI, Huergo L, Souza EM, Pedrosa

FO, et al. Identification of aeromonas species by matrix-assisted

laser desorption ionization-time of flight mass spectrometry

(maldi-tof ms). Clinical Chemistry and Laboratory Medicine.

2011;49:S833-S.

15. Szabados F, Woloszyn J, Richter C, Kaase M, Gatermann S.

Identification of molecularly defined Staphylococcus aureus

strains using matrix-assisted laser desorption/ionization time

of flight mass spectrometry and the Biotyper 2.0 database.

Journal of Medical Microbiology. 2010;59(7):787-90.

Tabla 1. Porcentajes de concordancia de resultados entre los dos

sistemas de identificación automatizada en evaluación: Sistema

de identificación automatizada WIDER / VITEK2 vs Espectrometría

de masas MALDITOF MS®.

ANAEROBIOS

IDENTIFICACIÓN STANDARD vs ID. MALDITOF-MS®

(n)

Concordancia

Género n (%)

Concordancia

Especie n (%)

Total

4

4 (100)

4 (100)

Propinobacterium

acnés

1

1 (100)

1 (100)

Bacteroides fragilis

1

1 (100)

1 (100)

Clostridium

perfringens

2

2 (100)

2 (100)