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ORIGINAL

Actualidad

Médica

A C T U A L I D A D

M É D I C A

www.actualidadmedica.es

©2014.Actual.Med.Todoslosderechosreservados

Detección de carbapenemasas en pseudomonas

aeruginosa mediante espectometría de masas

MALDI-TOFMS

Resumen

Introducción

: Las bacterias gramnegativas, especialmente Pseudomonas, presentan con frecuencia resistencia

a múltiples antibióticos incluyendo carbapenemes. La resistencia a carbapanemes se ha incrementado en los

últimos años causada por alteraciones de membrana o por la producción de carbapenemasas.

Objetivo:

Valorar la utilización de la espectrometría de masas MALDI-TOF MS® para la detección de

carbapenemasas clase A o B en Pseudomonas aeruginosa.

Material

y métodos

: Partiendo de 12 aislados de Pseudomonas aeruginosa productoras de carbapenemasas

clase A o B identificados mediante método de difusión disco-placa, tipificadas usando los discos: meropenem

10µg, meropenem 10µg + ácido borónico, meropenem 10µg + cloxacilina y meropenem 10µg + ácido

dipicolínico (Rosco Diagnostica), hemos analizado posibles picos de hidrólisis del meropenem tras la acción

de las carbapenemasas mediante espectrometría de masas MALDI-TOF MS®. Como controles negativos se

utilizaron 25 cepas de Pseudomonas aeruginosa sensibles a meropenem y 8 cepas de Pseudomonas aeruginosa

con impermeabilidad de membrana, no detectables mediante la metodología utilizada.

Resultados

: De las 12 cepas productoras de carbapenemasas clase A o B, (2/12 clase A, 10/12 clase B), la

técnica de espectrometría de masas MALDI-TOF MS® detectó picos de degradación del antibiótico en estudio

correspondientes a la presencia de carbapenemasas en 11/12 casos (94.4%). En las cepas usadas como

controles negativos, la espectrometría de masas MALDI-TOF MS® indicó la ausencia de carbapenemasas clase

A o B en 31/33 (93.9%) casos.

Conclusión

: La espectrometría de masas MALDI-TOF MS® puede ser una herramienta útil para la confirmación

de carbapenemasas clase A y B en Pseudomonas aeruginosa.

Abstract

Introduction:

Gram-negative bacteria especially Pseudomonas are resistance to multiple antibiotics including

carbapenems. Carbapanemes resistance has increased in recent years caused by alterations of membrane or

the production of carbapenemases.

Objective

: Assess the use of MALDI-TOF MS® mass spectrometry for the detection of carbapenemases class A

or B in Pseudomonas aeruginosa.

Material

and methods

: From isolated from Pseudomonas aeruginosa producing carbapenemases 12 class A

or B identified by diffusion method disco-plate, classified using disks: meropenem 10μg, meropenem 10μg

+ boronic acid, meropenem 10μg + cloxacillin and meropenem 10μg + acid dipicolinic (Rosco Diagnostica),

we analyzed possible hydrolysis of meropenem peaks after the action of the carbapenemases by MALDI-TOF

MS® mass spectrometry. As negative controls were used 25 strains of Pseudomonas aeruginosa sensitive to

meropenem and 8 strains of Pseudomonas aeruginosa with waterproof membrane, not detectable by the

methodology used.

Results:

Of the 12 strains producing carbapenemases class A or B, (2/12 class A, 10/12 class B), MALDI-TOF

MS® mass spectrometry technique detected peaks of degradation of the antibiotic in study to the presence

of carbapenemases in 11/12 cases (94.4%). The strains used as controls negative, MALDI-TOF MS® mass

spectrometry indicated the absence of carbapenemases class A or B at 31/33 cases (93.9%).

Conclusion

: MALDI-TOF MS® mass spectrometry can be a useful tool for the confirmation of carbapenemases

class A and B in Pseudomonas aeruginosa.

Raquel Camacho-Luque

,

Alejandro Peña-Monje, Marta Álvarez-Estévez

,

Natalia Chueca-

Porcuna

,

Federico García

Servicio de Microbiología. Complejo Hospitalario Universitario de Granada, Centro San Cecilio-PTS. Instituto de

Investigación Biosanitaria ibs.Granada.

Enviado: 30-06-2014

Revisado: 20-01-2015

Aceptado: 26-01-2015

Palabras clave:

Carbapenemasas, MALDI-TOF

MS®, Pseudomonas aeruginosa,

Detección rápida

Keywords: Carbapenemases,

MALDI-TOF MS®,

Pseudomonas aeruginosa,

Fast Detection

Carbapenemase detection in Pseudomonas aeruginosa by

MALDI-TOF MS mass spectrometry

Actual. Med.

2015; 100: (794): 15-17

DOI: 10.15568/am.2015.794.or03

Raquel Camacho-Luque

raquelcluque@hotmail.com

Servicio de Microbiología Clínica. Hospital Universitario San Cecilio.

Avd. Doctor Oloriz s/n, 18012 - Granada. España - Telf. 958023879.