Revista nº 798

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85 ORIGINAL
Actualidad
Médica
A C T U A L I D A D
M É D I C A
©2016.Actual.Med.Todoslosderechosreservados
Optimización del cultivo de queratinocitos
humanos para el desarrollo de un modelo de
piel artificial humana: alternativas celulares
como capa alimentadora
Resumen
Objetivos:En el presente estudio se persigue optimizar el cultivo de queratinocitos para desarrollar unmodelo de piel artificial
humana. Para ello, se utilizan como capa alimentadora células de origen humano: fibroblastos dérmicos humanos y células
mesenquimales troncales derivadas de tejido adiposo. Los resultados obtenidos se comparan con los fibroblastos 3T3, capa
alimentadora deorigenmurinoutilizada desdehacedécadas.
Metodología:Se llevó a cabo un estudio experimental, utilizando células de origen humano y células de origenmurino subletal-
mente irradiadas, como capa alimentadora para el establecimientodel cultivodequeratinocitos. Se evaluó la tasa de expansión
celular y la tasa de duplicación en el pase celular de queratinocitos y en la recuperación celular final que se llevó a cabo a las 3
semanasdecultivo;asícomoelrendimientocelulary laviabilidadcelular,quetambiénseevaluaronenelprocesamiento inicial.
Resultados:Losresultadosdeterminanque losfibroblastosdérmicoshumanos irradiadosy lascélulasmesenquimalestroncales
derivadas de tejido adiposo pueden actuar como capa alimentadora promoviendo la adhesión y la expansión celular de los
queratinocitos. Los fibroblastos dérmicos humanos proporcionan resultados equiparables a los obtenidos con los fibroblastos
3T3murinos.
Conclusiones:Los fibroblastos dérmicos humanos irradiados proporcionan una capa alimentadora funcional que permite la ex-
pansión invitrodemaneraeficazde losqueratinocitosquesevanautilizarconfinesclínicosparaeldesarrollodeunmodelode
piel artificial humana.
Abstract
Purpose: This study aims to optimize keratinocyte culture to develop an artificial human skin model. For this purpose, human
cells are used as feeder layer: human dermal fibroblasts and adipose derivedmesenchymal stemcells. The results obtained are
comparedwith3T3fibroblasts,murine feeder layer used for decades.
Methods: We conducted an experimental study using human and murine sub-lethally irradiated cells as feeder layer for the
establishmentofkeratinocyteculture.Cellexpansionrateanddoublingratewereevaluated inthekeratinocytecellpassageand
in the final cell recovery (was carried out at 3 weeks). The yield and viability of keratinocytes were also evaluated in the initial
processing.
Results:Theresultsdeterminethat irradiatedhumandermalfibroblastsand irradiatedadiposederivedmesenchymalstemcells
can act as feeder layer promoting adhesion and expansion of keratinocytes. Human dermal fibroblasts provide comparable
results to thoseobtainedwithmurine 3T3fibroblasts.
Conclusions: Irradiatedhumandermal fibroblasts provide a functional feeder layerwhich allows effectively in vitro expansionof
keratinocytes tobeused for clinical purposes for thedevelopment of an artificial human skinmodel.
Ana Fernández González 1,3, Antonio Manuel Lizana Moreno 1,3, María del Mar de Pablos
Ramos 1,3, Antonio Ruiz García 1,2,3, Olga Espinosa Ibáñez 1,3, Natividad Fernández Porcel 1,2,3,
Jorge Guerrero Calvo 1,2,3, Miguel Arrabal4, López-Carmona F.4 , Salvador Arias-Santiago 1,3
1 Unidad de Producción Celular e Ingeniería Tisular. Instituto de Investigación Biosanitaria ibs. GRANADA. Complejo
Hospitalario Universitario de Granada. Granada, Spain
2 ECAI Unidad de Calidad de la Unidad de Producción Celular e Ingeniería Tisular. Instituto de Investigación
Biosanitaria ibs.GRANADA. Complejo Hospitalario Universitario de Granada. Granada, Spain
3 Iniciativa Andaluza en Terapias Avanzadas
4 Unidad de Gestión Clínica de Urología. Complejo Hospitalario Universitario de Granada.
Enviado: 30-07-2016
Revisado:15-08-2016
Aceptado: 22-08-2016
Palabras clave: Piel artificial,
Queratinocitos, Capa
alimentadora, Fibroblastos 3T3,
Fibroblastos dérmicos humanos,
Células mesenquimales
troncales derivadas de tejido
adiposo
Keywords: Artificial skin,
Keratinocytes, Feeder layer,
3T3 fibroblasts, Human dermal
fibroblasts, Adipose derived
mesenchymal stem cells
Optimization of human keratinocyte culture to develop
an artificial human skin model: cell alternatives as feeder
layer of Advanced Therapies
Actual. Med.
2016; 101: (798): 85-94
Ana Fernández González
Unidad de Producción Celular e Ingeniería Tisular. Instituto de Investigación
Biosanitaria de Granada. Complejo Hospitalario Universitario de Granada
Av. Fuerzas Armadas nº 2, 4ª Planta Edificio de Gobierno. 18014 - Granada
Teléfono: 958 020 749
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