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Ana Fernández González
Optimización del cultivo de queratinocitos para el desarrollo de un modelo de piel artificial humana
PROCESAMIENTO INICIAL F0
PASE CELULAR F1
RECUPERACIÓN FINAL (RF)
Densidad
de
siembra
F0
Dosis de
irradiación
F0
Queratinocitos
F0
% de
Viabilidad
Celular F0
Densidad de
siembra F1
Dosis de
irradiación
F1
Queratinocitos
F1
% de
Viabilidad
Celular F1
Queratinocitos
RF
% de
Viabilidad
Celular RF
Células
mesenquimales
troncales
derivadas de
tejido adiposo
(ADMSC)
n=1
10.000
cél./cm
2
100 Gy
6.123.000
83,0
10.000 cél./
cm
2
100 Gy
17.878.500
91,0 %
10.582.500
91,0
Células
mesenquimales
troncales
derivadas de
tejido adiposo
(ADMSC)
n=1
10.000
cél./cm
2
50 Gy
11.520.000
80,0
10.000 cél./
cm
2
50 Gy
-
-
330.000
72, 0
Tabla 4. Número de queratinocitos y porcentaje de viabilidad celular en cada fase de cultivo celular utilizando células mesenquimales troncales
derivadas de tejido adiposo como feeder.
Tabla 5. Tasa de expansión celular de queratinocitos en función del tipo de feeder en el pase celular y en la recuperación final.
Tabla 6. Tasa de expansión celular de queratinocitos en cada fase de cultivo celular utilizando células mesenquimales troncales derivadas
de tejido adiposo como feeder.
PROCESAMIENTO INICIAL F0
PASE CELULAR F1
RECUPERACIÓN FINAL (RF)
Densidad
de siembra
F0
Dosis de
irradiación
F0
Queratinocitos
F0
Densidad de
siembra F1
Dosis de
irradiación
F1
Queratinocitos
F1
Tasa de
Expansión
Celular F1
Queratinocitos
RF
Tasa de
Expansión
Celular RF
Tasa de
Expansión
Celular Total
Fibroblastos
3T3 (Sigma)
n=3
80.000
cél./cm
2
50 Gy
3.601.092
80.000 cél./
cm
2
50 Gy
6.252.833
1,87
85.190.833
13,97
27,47
Fibroblastos
3T3 (ATCC)
n=3
40.000
cél./cm
2
50 Gy
3.382.388
10.000 cél./
cm
2
50 Gy
12.883.750
3,67
101.136.417
8,50
31,13
Fibroblastos
dérmicos
humanos
(FH)
n=3
10.000
cél./cm
2
50 Gy
3.892.889
10.000 cél./
cm
2
50 Gy
9.025.370
2,43
84.626.291
9,13
28,10
PROCESAMIENTO INICIAL F0
PASE CELULAR F1
RECUPERACIÓN FINAL (RF)
Densidad
de siembra
F0
Dosis de
irradiación
F0
Queratinocitos
F0
Densidad
de siembra
F1
Dosis de
irradiación
F1
Queratinocitos
F1
Tasa de
Expansión
Celular F1
Queratinocitos
RF
Tasa de
Expansión
Celular RF
Tasa de
Expansión
Celular Total
Células
mesenquimales
troncales
derivadas de
tejido adiposo
(ADMSC)
n=1
10.000
cél./cm
2
100 Gy
6.123.000
10.000
cél./cm
2
100 Gy
17.878.500
2,92
10.582.500
0,59
1,73
Células
mesenquimales
troncales
derivadas de
tejido adiposo
(ADMSC)
n=1
10.000
cél./cm
2
50 Gy
11.520.000
10.000
cél./cm
2
50 Gy
-
-
330.000
-
0,03